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    銀耳衛生標準

    發布時間:2005-04-21

      來源:中國食用菌商務網

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     1主題內容與適用范圍
       
    本標準規定了市售銀耳的衛生要求。
       
    本標準適用于人工合成料栽培銀耳、人工段木栽培銀耳和野生銀耳。銀耳制品和鮮銀耳亦可參照此標準。
        2
    引用標準
        GB5009.11
    食品中總砷的測定方法
        GB5009.12
    食品中鉛的測定方法
        GB5009.17
    食品中總汞的測定方法
        3
    感官指標
       
    感官指標見表1
       
    項目指標
       
    外形色澤氣味
       
    干成品朵形完整。合成料栽培葉片白色或淺黃色,應具有銀耳正常
       
    銀耳直徑≥3cm;段木表面有光澤,耳基芳香氣味,無異
       
    栽培銀耳直徑≥lcm部呈米黃色或橙色,味、異嗅
       
    無霉點,霉斑
       
    干成品浸泡(40℃,30min)朵形
       
    完整,直徑明顯增大,
       
    葉片應完全展開或基本
       
    展開,邊緣整齊,有彈
       
    性,無發粘,軟塌現象  
        4
    理化指標
       
    理化指標見表2
       
    項目指標,mg/kg
       
    米酵菌酸0.25
       
    (Pb)2.0
       
    (As)1.5
       
    (Hg)0.6
        5
    檢驗方法
        5.1
    米酵酸菌[bongkrekicacid(BA),即酵米面黃桿菌毒索A(flavotoxinA)〕是由椰毒假單胞菌(pseudomanascocovenenans)產生的一種可以引起食物中毒的毒素。系統命名為:3-羧甲基-17-甲氧基-6,18,21-三甲基-甘二碳-24,8,1214,18,20-七烯二酸、結構式為:
        5.1.1
    薄層色譜測定法
        5.1.1.1
    原理
       
    樣品中的米酵菌酸經提取、凈化及濃縮后,根據其在短波紫外光GF254硅膠薄層色譜上顯示黑色點的最低檢出量測定含量。
        5.1.1.2
    儀器
        a.
    層析槽(內徑長××高,cm25×6×4)
        b.GF254
    娃膠薄層(50mm×200mm×0.3mm),自制,經110115℃活化2?3h,置干燥器中可保存一周;
        c.
    紫外線燈(波長254nm)
        d.
    紫外分光光度計。
        5.1.1.3
    試劑
       
    本標準所用的試劑除特殊規定外,均為分析純,水為蒸餾水或同等純度的水,溶液為水溶液。
        a.
    硅膠GF254層析用;
        b.
    薄層色譜展開劑:石佃醚-無水乙醚-冰乙酸[6040l.5(vv)〕;
        c.
    米酵菌酸標準溶液:稱取米酵菌酸標準品,用甲醇配制成每毫升含有米酵茵酸20μg作測定用,置于4℃冰箱中避光保存;
        d.
    甲醛;
        e.
    冰乙酸;
        f.
    石油醚,沸程30?60℃;
        g.
    無水乙醚;
        h.
    三氯甲烷;
        i.85g
    100mL磷酸;
        j.4
    (VV)碳酸氫鈉水溶液;
        k.6mol
    L鹽酸。
        5.1.1.4
    操作方法
        5.1.1.4.1
    米酵菌酸的提取
       
    干銀耳樣品經粉碎過40目篩后,稱取20g,置具塞錐形瓶中,加入甲醇20mL,于室溫中避光浸泡lh,然后再加入三氯甲烷80mL85g100mL磷酸0.2mL,鮮銀耳樣品經剪碎、磨細及混勻后稱取10g,加入甲醇16mL于室溫中避光浸泡lh,然后再加入三氯甲烷64mL85g100mL的磷酸0.16mL;振蕩30min,過濾,干銀耳取濾液50mL,鮮銀耳取濾液40mL
       
    將以上濾液移入分液漏斗中,加入與濾液體積相同的4(VV)碳酸氫鈉水溶液,振搖2min,靜置分層,用帶自動控制球吸管吸出上層于另一分液漏斗中,再用4(VV)碳酸氫鈉水溶液重復提取兩次,每次10mL,輕搖,靜置,將三次碳酸氫鈉水層合并,加入三氯甲烷25mL,振搖2min,靜置分層后棄去三氯甲烷層,于分液漏斗中慢慢滴入6molL鹽酸以調該溶液PH2?3,加入石油醚(沸程30?60℃)50mL(鮮銀耳樣品加40mL),振搖3min,靜置分層,取出石油醚層于梨形瓶中,再重復用石油醚30mL20mL各提取一次(鮮銀耳樣品兩次均為20mL),將石油醚層并人同一瓶中,于40℃水浴中減壓吹氣濃縮至干,用甲醛移至帶lmL刻度的濃縮管中,于40℃用減壓法濃縮至0.2mL以下,并用少許甲醇洗管壁,繼續濃縮至干,加甲醛0.125mL,將干物質溶解,混勻,作為樣液以供薄層色譜測定用。
        5.1.1.4.2
    薄層色譜測定
       
    以薄層板的短邊為底邊,距底邊3cm的基線上用微量注射器滴加20ugmL標準液8μL10μL兩個點,以及樣液兩個點,每點10μL(鮮銀耳樣品滴加20μL),在樣液的一個點上再滴加20μgmL標準液10μL。用展開劑展開16cm,取出揮干。在254nm紫外燈光下觀察結果如下:(1)標準點應出現黑色點;(2)如樣液點在標準點相應位置上未出現黑色點,則樣品中米酵菌酸的含量在測定方法靈敏度0.25ppm以下;如在相應位置上有黑色點,而另一點中樣液與標準液點重疊,則為陽性,根據樣液黑點的強度估計減少滴加微升數,或經稀釋后再滴人不同微升數,直至樣液與標準色點的強度與面積一致為止。米酵菌酸的比移值為0.22。
        5.1.1.4.3
    計算
        V11
        X1=0.2?------?D?----…………………(1)
        V2m1
       
    式中:X1?米酵菌酸含量,μgg;
        0.2??
    米酵菌酸的最低檢出量,μg
        V1?
    加入甲醇溶解的體積,mL
        V2?
    出現最低檢出量時滴加樣液的體積,mL;
        D??
    樣液的總稀釋倍數;
        m1?
    甲醇溶解時相當樣品的質量,g
        5.1.1.4.4
    確證試驗
       
    對含量高的樣品可以進一步作確證試驗;將剩余的陽性樣液與空白甲醇液分別經薄層分離后,刮下并收集與米酵菌酸標準相應的色譜帶與空白處硅膠。各加甲醇4mL,于室溫中浸泡l2h,混勻,離心,吸出上清液,以空白硅膠甲醇洗脫液作對照,用紫外分光光度計測定,應在267nm236nm處有米酵菌酸的兩個最高吸收峰。
        5.1.2
    高壓液相色譜測定法
        5.1.2.1
    原理
       
    樣品中的米酵菌酸經提取、凈化及濃縮后,根據在高壓液相色譜上的出峰面積測定含量。
        5.1.2.2
    試劑
        a.
    高壓液相色譜洗脫劑:甲醇--冰乙酸[75271.7(VV),在配制前,所用試劑及水均需分別重蒸餾。
        b.
    其他試劑同5.1.1.3cd、e、I、g、h、i、jk
        5.1.2.3
    儀器
        a.
    高壓液相色譜儀;
        b.20μL
    樣品環;
        c.
    分光光度檢定器,調波長至267nm
        d.
    求積儀;
        e
    、防護柱4.6mmID×5cm,內裝C?18硅膠,粒度直徑為10μm;
        f.
    分析柱AltexUltrasphereTM?ODS,粒度直徑為u5m,4.6mmID×25cm。
        5.1.2.4
    操作方法
        5.1.2.4.1
    米酵菌酸的提取
       
    5.1.1.4.1,但最后不用甲醇轉移,直接于瓶內加入甲醇0.5mL,將干物質溶解,混勾,取出上清液經離心后,置小試管中,作為樣液供高壓液相色譜測定用。
        5.1.2.4.2
    高壓液相色譜測定
       
    高壓液相色譜操作條件:流速1.1mLmin,紙速0.5cmmin,檢定器靈敏度為將10μgmL標準液20uL調至滿刻度的70%一90%。在作高壓液相色譜時,首先用洗脫液平衡分析柱,從進樣口裝置分別進入不同濃度的標準液與樣液各20uL。在米酵菌酸標準峰面積的直線范圍內。將樣液與標準的峰面積相比以求出樣品中米酵菌酸的含量。米酵菌酸的保留時間為17min。
        5.1.2.4.3
    計算
        A1
        X2=C?----?V?D------……………………(2)
        Sm2
       
    式中:X2?米酵菌酸含量,μgg
        C??
    米酵菌酸標準溶液的濃度,μgmL
        A??
    樣液的峰面積;
        s??
    米酵菌酸標準溶液的峰面積;
        v??
    加入甲醇溶解的體積,mL;
        D??
    樣液的總稀釋倍數;
        m2?
    甲醇溶解時相當樣品的質量,g。
        5.1.2.4.4
    確證
       
    如陽性樣品還需用薄層色譜法中樣液與標準液點重疊的方法確證。
        5.2
    鉛的測定
       
    按照GB5009.12執行。
        5.3
    砷的測定
       
    按照GB5009.11執行。
        5.4
    汞的測定
       
    按照GB5009.17執行

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