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    　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食用菌產(chǎn)品中總糖含量的測定方法。
    　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于黑木耳、銀耳和茯苓三類食用菌中總糖的測定。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于蛋白質(zhì)含量高的其他菇類（蘑菇、香菇、平菇等）中總糖含量的測定。
   
    2 引用標(biāo)準(zhǔn)
    　　GB 12530 食用菌取樣方法
    　　GB 12531 食用菌含水量測定
   
    3 方法提要或原理
    　　黑木耳、 銀耳和茯苓中水溶性糖和水不溶性多糖經(jīng)熱稀鹽酸徹底水解后轉(zhuǎn)化成還原糖，還原糖可用費(fèi)林氏容量法定量，以此計(jì)算出樣品中總糖含量。
   
    4 試劑
    　　分析中，除另有說明，均限用分析純試劑、蒸餾水或相當(dāng)純度的水。
    4.1 氫氧化鈉（GB 629）。
    4.2 濃鹽酸（GB 622）：密度1.18g/mL。
    4.3 氫氧化鈉（GB 629）溶液：6mol/L。
    4.4 費(fèi)林氏試劑
    4.4.1 A液：溶解69.28g五水合硫酸銅（GB 665，CuSO4·5H2O）于水中，定容至1000mL，過濾后備用。
    4.4.2 B液：溶解346g酒石酸鉀鈉（GB 1288，NaKC4H4O6·4H2O）和100g氫氧化鈉（4.1）于水中，定容至1000mL，過濾后備用。
    4.5 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：精確稱取烘干的葡萄糖1.0000g，精確到0.0001g，用水溶解，加入5mL濃鹽酸（4.2），再以水配制成10g/L濃度溶液定容至1000mL，成為1g/L濃度溶液。
    4.6 次甲基藍(lán)（HG B33 94）指示液：10g/L。
   
    5 儀器、設(shè)備
    5.1 電熱鼓風(fēng)干燥箱。
    5.2 小型植物粉碎機(jī)：備有1mm孔徑的金屬篩網(wǎng)。
    5.3 玻璃研缽：備有研杵。
    5.4 分樣篩：備有孔徑0.84mm（20目）篩子。
    5.5 分析天平：感量0.0001g。
    5.6 電熱水浴鍋。
    5.7 廣口瓶：帶磨口。
    5.8 濾紙：直徑15cm。
    5.9 玻璃三角漏斗：直徑75mm。
    5.10 圓底燒瓶：250mL，上部插有作回流用的30cm長玻璃管。
    5.11 容量瓶：250、1000mL。
    5.12 量筒：100mL。
    5.13 燒杯：25、500mL。
    5.14 錐形瓶：250mL。
    5.15 移液管：5、10、20mL。
    5.16 酸式滴定管：50mL。
    5.17 稱量瓶。
    5.18 廣范pH紙。
    5.19 可調(diào)電爐：0～600W，附石棉網(wǎng)。
    5.20 玻棒和滴管。
   
    6 樣品
    6.1 取樣方法和數(shù)量
    6.1.1 干制品按GB 12530中規(guī)定要求進(jìn)行。總量不得少于100g。
    6.1.2 鮮耳和鮮茯苓在每批不同的地方隨機(jī)取樣作為原始樣品，總量不得少于1000g。
    6.2 試樣的制備
    6.2.1 干品直接用剪刀剪成小塊，在80～100℃干燥箱中烘至發(fā)脆后冷卻，立即用小型植物粉碎機(jī)粉碎。棄去開始粉碎出的樣品（約占總樣十分之一）。粉碎過的樣品需過20目篩。未能過篩部分經(jīng)烘干之后再次粉碎或經(jīng)缽內(nèi)研磨之后再次過篩，直至全部樣品過篩為止。過篩后的樣品裝入清潔的廣口瓶內(nèi)。樣品密封后填寫標(biāo)簽，注明品名、日期、交樣單位和取樣人等。
    6.2.2 鮮耳取樣后用手撕成小塊，鮮茯苓則需去皮后用小刀切成小塊。樣品均勻地?cái)傇诟稍锵鋬?nèi)墊有紗布的鐵絲網(wǎng)上，50℃鼓風(fēng)干燥6h以上，待樣品半干后再逐步提高溫度至80～100℃。樣品發(fā)脆之后冷卻，立即用粉碎機(jī)粉碎。其他操作同干品。
   
    7 分析步驟
    7.1 稱樣和水解：稱取約0.25g試樣，精確到0.0001g，小心地倒入圓底燒瓶中，加100mL水和10mL濃鹽酸（4.2）。燒瓶瓶口插上回流用的玻璃管，置100℃沸水浴上水解3h。冷卻后過濾。濾渣用100mL水無損地洗回到圓底燒瓶中（用滴管小心地操作），再加酸10mL，重復(fù)上述操作。合并兩次過濾液，用6mol/L氫氧化鈉溶液（4.3）調(diào)節(jié)pH至 中性（用pH紙測試），適當(dāng)加熱濃縮后定容至250mL。同時(shí)，按GB 12531中規(guī)定的方 法稱樣并測定試樣的含水量。
    7.2 費(fèi)林氏液的標(biāo)定：準(zhǔn)確吸取費(fèi)林氏A液（4.4.1）和B液（4.4.2）各5mL于 250mL錐形瓶中，混勻，加玻璃珠數(shù)粒，置于石棉網(wǎng)上加熱。快速從滴定管中放入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（4.5）49mL，調(diào)節(jié)溫度，使之在2min內(nèi)沸騰，保持微沸2min，期間加入次甲基 藍(lán)指示液（4.6）3滴；隨后逐滴加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至藍(lán)色褪盡。滴定過程須在3min總沸騰時(shí)間內(nèi)完成。10mL費(fèi)林氏混合液需耗葡萄 糖標(biāo)準(zhǔn)溶液50mL左右。該滴定值為所配制的費(fèi)林試劑標(biāo)定值。在大批樣品測定時(shí)，可將A、B液等體積混合后標(biāo)定和使用，混合液保存不宜超過一個(gè)月。
    7.3 試樣液的滴定：250mL錐形瓶中加入費(fèi)林A、B液各5mL，混勻，再加入試樣液10～20mL，加玻璃珠數(shù)粒，置于石棉網(wǎng)上加熱。在正式滴定前， 應(yīng)先用一份試樣進(jìn) 行粗滴定，一邊加熱一邊逐滴加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液，確定出試樣液大致耗糖體積。正式滴定時(shí)，錐形瓶加熱后應(yīng)快速從滴定管中放出比實(shí)際少1mL左右的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液，其他操作同費(fèi)林氏液的標(biāo)定。
   
    8 分析結(jié)果的計(jì)算
    8.1 計(jì)算
   
    總糖（干基，以葡萄糖計(jì)，％）=〔（V0-V1）×0.001×250〕/V2×m×（1-X）〕×100
   
    式中：V0── 10mL費(fèi)林氏混合液耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的體積，mL；
    V1── 試樣液滴定時(shí)耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的體積，mL；
    V2── 試樣液吸取體積，mL；
    m── 試樣的質(zhì)量，g；
    0.001── 1mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液中葡萄糖質(zhì)量，g；
    250── 兩次水解液合并后定容的體積，mL；
    X── 樣品含水量，％。
   
    8.2 允許差
    　　取平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值作為測定結(jié)果，保留小數(shù)后一位。
    　　平行測定結(jié)果的絕對差值不大于1.0％。